台湾研究从蛇毒中提炼结晶毒蛋白

【本刊讯】蒋帮《自立晚报》七月九日以《研究蛇毒有成就提炼结晶毒蛋白可增加抗体》为题报道：
蛇毒是一种多成分的复杂混合物，含有许多具有酵素活性的蛋白质，过去曾有人把蛇毒的毒性，归因于酵毒的作用。
我们现在已可将蛇毒中有毒成分与所有已知具有酵素活性的成分一一分离，证明蛇毒的主要致死毒素，并不含酵素活性，若欲明了蛇毒毒性的本质，首先要完成三件工作：①必须分离及精制蛇毒内的主要毒蛋白。②决定其化学构造。③进而探讨构造与毒性的相互关系。
从蛇毒中得到纯粹结晶毒素，工作并不简单，过去有人尝试却未成功，主要原因为：①蛇毒是一种复杂的混合物，由许多密切关联的蛋白成分构成，不易用早年一般已知的方法，分离其中各成分。②要从复杂混合物中，分离出主要毒蛋白，进而精制使其结晶化，需要收集大量蛇毒，然一条眼镜蛇的毒量，仅在零点一克以下，如何能得大量蛇毒，非常困难。
蛇毒原料方面，每年由高雄港输出到香港十几万条蛇中的眼镜蛇、逐一采集其毒液，经冷冻干燥处理程序，制成干燥毒素，约二、三磅多。
利用硫铵沉淀，以及反复的离子交换处理，从眼镜蛇毒中，得到一种毒力强六点七倍的美丽棒状结晶，命名为ＣＯＢＲＯＴＯ—ＸＩＮ，此结晶毒蛋白利用各种方法实验，均被证实有均一性，且被证明为眼镜蛇毒中的主要毒蛋白。
由分析氨基酸的结果，知道结晶毒蛋白是由十五种不同的氨基酸所构成的，其中不含丙胺酸、甲硫胺酸及苯丙胺酸。依其组成的六十二个氨基酸计算，其分子量为“６９４９”，进一步分析，证明结晶毒蛋白的氮端氨基酸为白胺酸，碳端为天门冬胺酸，并且其分子是由四个双硫链连接而成的单多胜肽链。
决定氨基酸之排列顺序，首先用胰蛋白酶，部分分解后，利用高压电气泳动法与纸色层分析法，分离得到九个胜肽分节，然后测得各胜肽的氨基酸组成，并决定其排列顺序，随即将之与利用胰凝乳蛋白酶分解所得的胜肽组成相比较，发现许多重复的地方，由此可推定九个胰蛋白胜肽如何互相连成一个完整的毒蛋白分子，而决定这六十二个氨基酸的整个排列顺序。
结晶毒蛋白的立体构造——决定分子内双硫链的位置，对于确定蛋白构造及研究其与毒性的关系非常重要——应用Ｘ光绕射法。
研制的纯粹蛇毒免疫抗体成功后，对人禽被毒蛇咬伤具有特殊的疗效，不但抗毒力比目前的抗毒血清要高十七点五倍以上，且其副作用也相对减少。
目前的抗毒血清所含的抗体成分，仅百分之二点五，其余的百分之九十七点五是没有治疗效果的蛋白成分，注射人体后，往往生副作用，所以部分被蛇咬者，虽注射抗毒血清也难免于一死，如用最近制造成功的“纯化抗体”，则有令人鼓舞的治疗效果。